本发明公开了一种预放大核酸及其应用，预放大核酸包括5’端碱基序列、第一互补区、重复序列、第二互补区和3’端碱基序列；5’端碱基序列、第一互补区、重复序列、第二互补区和3’端碱基序列依次相接；第一互补区和第二互补区配对；5’端碱基序列和3’端碱基序列均与检测探针配对；5’端碱基序列的Tm值和3’端碱基序列的Tm值相差≤1℃；重复序列和标记探针或放大核酸配对；预放大核酸用于对目标核酸进行信号放大检测；通过第一互补区和第二互补区配对，重复
序列形成茎环状的二级结构从而可以增加放大倍数，同时预放大核酸的二级结构更加稳定，并不易增加非特异杂交产生的背景信号，从而改善检测的信噪比。